Microgen Kültür Besiyerleri

SUSUZ KÜLTÜR BESİYERLERİ

ürünlerimiz, müşterilerimizin beklediği maksimum sonuçları elde etmek için yüksek kaliteli malzemelerden üretilmiştir. Belirli bir bileşenin işlevlerini ve reaksiyonlarını ve bir ortamdaki diğer bileşenlerle etkileşimini bilmek çok önemlidir. Burada malzemelerin sıkı bir şekilde değerlendirilmesi gerekliliği ortaya çıkmaktadır.

besiyerleri, iyi donanımlı ve yüksek verimli kalite kontrol departmanımız tarafından üretimden önce kapsamlı testlere tabi tutulur. İstenen sonuçları elde etmek için üretim süreci boyunca maksimum kalite kontrol önlemleri alınır. En büyük çabamız müşterilerimize maksimum kalitede ürünler sunmak olacaktır.

Süt, İlaç , Veterinerlik, Kozmetik, Su Arıtma, Halk Sağlığı ve Tıbbi Mikrobiyoloji bölümlerinin her türlü gereksinimlerini karşılamak için çok çeşitli kültür ortamı ürünleri sunuyoruz

Kültür ortamındaki mikroorganizma büyümesi bir dizi önemli faktöre bağlıdır :

• Uygun besinler mevcut olmalıdır.
• Gerektiğinde oksijen veya diğer gazlar mevcut olmalıdır.
• Nem gereklidir.
• Ortam uygun bir pH değerine sahip olmalıdır.
• Uygun sıcaklık olmalıdır.
• Ortam, biyolojik yük içermemelidir.
• Kirlenme önlenmelidir.

Tatmin edici bir mikrobiyolojik kültür ortamı için mevcut kaynakların :

• Karbon,
• Nitrojen,
• İnorganik fosfat ve sülfür,
• Eser Metaller,
• Su,
• Vitaminler

Bunlar başlangıçta et infüzyonu şeklinde tedarik edilmiştir, sığır eti veya maya ekstraktları kültür ortamındaki et infüzyonunun yerini almaktadır. Proteinlerin sindirimi olan peptonların eklenmesi, kolayca temin edilebilen azot ve karbon kaynakları sağlar.

Kültür ortamının pH değeri mikroorganizma gelişimi için önemlidir. Sıcaklık, mezofilik bakterilerin ve mantarların 25-40 C sıcaklıklarda optimal büyümeye sahip başka bir önemli parametredir; termofilik bakteriler ("ısı seven") sadece 45 ° C'den fazla olan psikrofilik ("soğuk seven") organizmalar 20 ° C'nin altındaki sıcaklıklara ihtiyaç duyarlar. İnsan patojenik organizmaları genellikle mezofillerdir.

BESİYER İÇERİKLERİ
Besiyer formülasyonları, bakterilerin ortam bileşenlerini kullanma becerisi üzerine geliştirilmiştir

BİLEŞENLER	KAYNAK
Amino-Nitrogen	Peptone, protein hydrolysate, infusions and extracts
Growth Factors	Blood, serum, yeast extract or vitamins, NAD
Energy Sources	Sugar, alcohols and carbohydrates
Buffer Salts	Phosphates, acetates and citrates
Mineral Salts and Metals	Phosphate, sulfate, magnesium, calcium, iron
Selective Agents	Chemicals, antimicrobials and dyes
Indicator Dyes	Phenol red, neutral red
Gelling agents	Agar, gelatin, alginate, silica gel

Besiyer İçerikleri
Pepton, protein hidrolizatları, İnfüzyonlar ve ekstraktlar kültür ortamındaki başlıca azot ve vitamin kaynaklarıdır. Peptonlar, kaynak materyalin hidrolizi veya sindirilmesi yoluyla proteinlerden türetilen suda çözünür bileşenlerdir.

Karbonhidratlar kültür ortamlarında enerji kaynakları olarak kullanılır ve cinsleri ayırt etmek ve türleri tanımlamak için kullanılabilir.

Tampon maddeler kültür ortamının pH değerini korur.

Seçici Maddeler arasında Safra Tuzları, boyalar ve antimikrobiyal ajanlar bulunur.

Safra Tuzları ve desoksikolat gram-negatif mikroorganizmaların izolasyonu için seçicidir ve gram-pozitif kokları inhibe eder.

Boyalar ve İndikatörlerdiferansiyel ve seçici kültür besiyerinin hazırlanmasında esastır. Bu formülasyonlarda, boyalar bakteriyostatik ajanlar, büyümenin inhibitörleri veya substratın asitliği veya alkalinitesindeki değişikliklerin göstergeleri olarak işlev görür.

Antimikrobiyal ajanlar bakteri, maya ve mantarların büyümesini engellemek için besiyerlerinde kullanılır.

Agar, jelatin ve albümin, dahil katılaştırıcı maddeler, kıvamı katı veya yarı katı bir duruma değiştirmek için bir sıvı ortama ilave edilebilir.

BESİYERLERİNDE ÇEVRESEL FAKTÖRLER
Atmosfer
Çoğu bakteri, normal oksijen gerilimi koşulları altında büyüyebilir. Zorunlu aeroblar oksijenin serbestçe kabul edilmesini gerektirirken, anaeroblar sadece atmosferik oksijen olmadan büyürler. Bu iki grup arasında kısmi anakrobik koşullar altında en iyi gelişen mikroaerofiller ve oksijen varlığında veya yokluğunda büyüyebilen fakültatif anaeroblar bulunur. Mikroorganizmaların büyümesi için anaerobik koşullar çeşitli şekillerde elde edilir :

• Sıvı ortamlara az miktarda agar ilavesi;
• Ortama taze doku eklenmesi;
• Ortama indirgeyici bir madde eklenmesi, örnek olarak; sodium thioglycollate, thioglycollic acid ve L-cystine;
• Havanın karbondioksit ile yer değiştirmesi;
• Oksijenin kimyasallar tarafından emilmesi;
• Katı ortamın derin katmanlarına veya sıvı ortamdaki bir yağ katmanına aşılama.

Birçok mikroorganizma % 5-10 CO₂ ortamına ihtiyaç duyar. Karbonik asit oluştukça pH'da bir azalma nedeniyle % 10'dan yüksek seviyeler genellikle inhibitördür. Kültür ortamları, ışığa ve havaya maruz kaldıklarında toksik oksidasyon ürünleri oluşturma eğilimlerinde farklılık gösterir.

Su Aktivitesi
Mikroorganizmaların sürekli büyümesi için uygun nem koşulları gereklidir. Organizmalar sulu bir ortam gerektirir ve "serbest" suya sahip olmalıdır. "Serbest" su karmaşık yapıya bağlı değildir ve besin maddelerinin ve zehirli atık ürünlerin transferi için gereklidir. İnkübasyon veya depolama sırasında buharlaşma, "serbest" su kaybına ve koloni büyüklüğünün azalmasına veya organizma büyümesinin tamamen inhibisyonuna yol açar.

Koruyucu Maddeler ve Büyüme Faktörleri
Kalsiyum karbonat, çözünür nişasta ve odun kömürü, kültür ortamında bakteriyel büyümenin ürettiği toksik metabolitleri nötralize etmek ve absorbe etmek için kullanılan koruyucu ajanlara örnektir.

NAD (V faktörü) ve hemin (X faktörü), bazı bakterilerin ihtiyaç duyduğu büyüme faktörleridir; örneğin, Haemophilus türleri ve Neisseria türlerinin daha fazla büyümesi için.

Polisorbat 80 dahil olmak üzere sürfaktanlar, ortam içinde süspansiyona alınan bakteriler arasındaki arayüzey gerilimini düşürmektedir. Bu aktivite, istenen bileşiklerin bakteri hücresine daha hızlı girmesine izin verir ve bakteri büyümesini artırabilir.

Susuz ortamdan kültür ortamının hazırlanması doğruluk ve hazırlığa dikkat gerektirir. Aşağıdaki noktalar kullanıcıya kültür ortamının başarılı ve tekrarlanabilir hazırlanmasında yardımcı olmak için dahil edilmiştir.

SUSUZ BESİYER VE BİLEŞENLERİ

• Aksi belirtilmedikçe serin (15-30C), karanlık ve kuru bir yerde saklayın.
• Açtığınız tarihi not alın.
• Son kullanma tarihini kontrol edin.
• Ürünün fiziksel özelliklerine uygun kullanın.

CAM MALZEME / PLASTİK MALZEME

• Yüksek kalite ve düşük alkali oranına sahip borosilikat cam kullanın.
• Deterjan kalıntılarından kaçının.
• Birkaç damla bromo timol mavisi ile alkali veya asit kalıntısı olup olmadığını kontrol edin.(sarı asitlidir; mavi alkalidir).
• Ortam hacminin en az 2-3 katı kap kullanın.
• Kazınmış cam eşyalar kullanmayın.

EKİPMAN

• Sıklıkla ve doğru şekilde kalibre edilmiş ölçüm cihazları, teraziler, pH metreler, otoklavlar ve diğer ekipmanları kullanın.

SU

• Damıtılmış veya deiyonize su kullanın.
• pH 5.5-7.5.

BESİYER DEĞİŞTİRME

• Uygun miktarda susuz ortam ağırlığını tartın.
• Ortamı tamamen çözün.
• Çözülürken ortamı çalkalayın.
• Aşırı ısınmamaya dikkat edin. Aşırı ısınmaya karşı çok hassas olan besiyerleri not edin. Aşırı ısınan besiyer sıklıkla daha koyu görünür. Mikrodalga fırında ısıtmayın.

STERİLİZASYON

• Otoklav ayar sıcaklığı 1210C olmalıdır.
• Rutin otoklav bakımı önemlidir. Üreticiden "sıcak" ve "soğuk" noktaları kontrol etmesini isteyin.
• Önerilen 15 dakikalık sterilizasyon, 1 litre veya daha az bir hacim alır. Daha büyük hacimler daha uzun döngüler gerektirebilir. Önerilen yük yapılandırmaları için otoklav üreticinize danışın.
• İki litreden fazla ortam miktarı, sterilizasyonun elde edilmesi için daha uzun bir otoklav süresi gerektirebilir. Daha uzun sterilizasyon döngüleri besin konsantrasyonu değişikliklerine ve engelleyici maddelerin oluşumuna neden olabilir.

TAKVİYELER VE ZENGİNLEŞTİRME

• Zenginleştirmeler ve takviyeler ısıya duyarlı olma eğilimindedir.
• Zenginleştirmeler veya takviyeler eklemeden önce ortamı su banyosunda 45-550 ° C'ye ayarlayın.

pH

• Ticari susuz ortamlar, buhar sterilizasyonundan sonra belirtilen pH aralığına düşecek şekilde tasarlanmıştır. Buhar sterilizasyonu sırasında pH yaklaşık 0.2 birim düşme eğilimindedir.
• Filtre sterilizasyonu için gerekirse filtrelemeden önce pH'ı ayarlayın.
• Aşırı pH ayarından kaçının.

BESİYER HAZIRLAMA

• Hazırlarken hafifçe karıştırın.
• Su buharlaşmasını azaltmak için dağıtmadan önce ortamı 50-550 ° C'ye soğutun
• Hızlı bir şekilde dağıtın.
• Otomatik bir plaka dağıtıcısı kullanılıyorsa, seçici ortamı dağıtmadan önce genel amaçlı ortamları dağıtın.
• Kirlenme olasılığını azaltmak için tüpleri derhal geri kazanın veya yeniden kapatın. Kuru bir yüzey elde etmek için Petri kabı kapaklarını 1-2 saat hafifçe açık bırakın.

SAKLAMA VE SON KULLANIM

• Genel olarak, plastik bir torbada veya başka bir kapta ters çevrilmiş buharla sterilize edilmiş kaplama ortamını karanlık bir buzdolabında 1-2 haftaya kadar saklayın.

KALİTE KONTROL

• Şirket içinde hazırlanan ortamlar için her ortamın her lotu test edilmelidir.
• Kalite Kontrol uygun şekilde sürdürülmelidir.
• Uygun kayıtları saklayın.
• Eksiklikleri üreticiye bildirin.

REFERANSLAR

1. Block, S. 1992. Sterilization, p. 87-103. Encyclopedia of microbiology, vol. 4. Academic Press, Inc., San Diego, CA.
2. Cote, R. J., and R. L. Gherna, 1994. Nutrition and media,p. 155-178. In P. Gerhardt, R.G. E. Murray, W.A. Wood, and N.R. Krieg (ed.), Methods for general and molecular bacteriology. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
3. The United States Pharmacopels (USP XXIII) and The National Formulary (NF 18). 1995. Sterilization and sterility assurance of compendial articles, p. 1976-1980. United States Pharmacopeial Convention Inc., Rockville, MD.
4. Perkins, J.J. 1969. Principles and methods of sterilization in health sciences, 2nd ed. Charles C. Thomas, Springfield, IL.
5. Leahy, T.J. 1986. Microbiology of sterilization processes. In F.J. Carleton and J.P. Agalloco (ed.), Validation of aseptic pharmaceutical processes. Marcel Dekker, Inc. New Yark, N.Y.
6. Simko, R.J. 1986, Organizing for validation. In F.J. Carleton and J.P. Agalloco (ed.), Validation of aseptic pharmaceutical processes. Marcel Dekker, Inc. New York, N.Y.

BAKTERİ KONTROL ZİNCİRİ
Kalite kontrol testinin ayrılmaz bir parçası, kalite kontrol organizmalarını içerir. Mikroorganizmalar saygın kaynaklardan, örneğin Amerikan Tip Kültür Koleksiyonu (ATCC) veya diğer ticari kaynaklardan elde edilmelidir.

BAKIM / DONMUŞ KÜLTÜR STOKLARI
Ticari stok kültürleri kullanıyorsanız, büyüme ve bakım için üreticinin önerilerini izleyin.

Staphylococcus türleri, Streptococcus türleri, Enterobacteriaceae ve Pseudomonas aeruginosa'nın dondurulmuş stok kültürlerini hazırlamak :

1. Gerekirse stok kültürünü yeniden oluşturun.
2. Genel amaçlı bir ortamın (örn., TSA veya kanlı agar) çoklu plakalarını inoküle edin.
3. Plakları uygun bir atmosferde ve önerilen sıcaklıkta 18-24 saat inkübe edin.
4. Saflığı ve doğru koloni morfolojisini kontrol edin.
5. Gerekirse biyokimyasal testleri doğrulayın.
6. 0.5 McFarland standardı (1-2 x CFU / ml) hazırlamak için birleşik alandan yeterli büyümeyi kaldırın.
   Hassas organizmalar için 1.0 McFarland'a ayarlayın.
7. 50-100 ml kriyoprotektif ortamda, örneğin% 10-15 Gliserol, Yağsız Süt veya steril defibrinli koyun kanı ile Triptik Soya Suyu içinde büyümeyi askıya alın.
8. Steril cam plastik dondurma şişelerine 0.5-1.0 ml dağıtın, Bir yıllık depolama için yeterli şişeler hazırlayın.
   Şişe başına yalnızca bir dondurma / çözme döngüsü olduğunu varsayın. Dört haftada bir en az bir taze kültür alın.
9. Şişeleri bir yıl boyunca -500C (dondurucu) veya altında saklayın.
   Ultra düşük sıcaklıkta dondurucuda veya sıvı nitrojen tankında saklanırsa organizmalar daha uzun (süresiz) kalacaktır.

DONMUŞ KÜLTÜR KULLANMA :

1. Şişeyi çabucak çözün.
2. Doğrudan altkültürü kullanın.
3. Kullanılmayan hücre süspansiyonunu atın.

ÇALIŞMA KÜLTÜRLERİ
Donmuş bir stok kültüründen en fazla üç seri alt kültür hazırlayın.

1. Bir agar eğimini veya plakasını dondurulmuş stok kültürüyle inoküle edin ve gece boyunca inkübe edin.
2. Çalışma kültürünü 2-8⁰C'de veya oda sıcaklığında dört haftaya kadar saklayın.
3. Saflığı ve uygun koloni morfolojisini kontrol edin.

or

1. Dondurulmuş stok kültürünü doğrudan bir çalışma kültürü olarak kullanın.

Pişmiş Et Ortamında veya başka bir uygun anaerobik ortamda anaerobik kültürleri muhafaza edin. Alternatif olarak, donmuş anaerobik kültürleri kullanın.

KONTROL PROSEDÜRÜ

1. Çalışma kültürünü bir agar plate inkübe edin.
2. Bir gece inkübe edin.
3. TSB'de küçük bir hacimde 3-5 izole koloni kalmalıdır. Uygun bir atmosferde ve sıcaklıkta 4-5 saat inkübe edin.
4. Bulanılık 625 nm'de 0.5 McFarland ve 0.08-0.1 absorbans birimlerine ayarlanmalıdır.

or

1. Kültürü bir gece kalacak şekilde 0.5 McFarland'a ayarlayın.
2. 1-2 x 10 CFU / ml koloni sayısını doğrulamak için numune 0.01 ml olmalıdır. Donmuş bir kültür kullanılıyorsa, uygun yoğunluğu onaylayın.

SONUÇLARI TEST ETMEK
NON-SELECTIVE BESİYER
Hücre süspansiyonu 1: 100'ü normal salin veya saf su ile seyreltin. 1-2 x 10 CFU / plaka vermek üzere her plakayı 0.01 ml ile inoküle edin. İzole koloniler elde etmek için gerekirse inokülumu on kat azaltın.


SELECTIVE BESİYER VE TÜP BESİYER
Hücre süspansiyonu normal tuzlu su veya saf su içinde 1:10 seyreltilir. 1-2 x 10 CFU / plaka sağlamak için 10.01 ml süspansiyon ile her plaka çizin. Bazı seçici ortamların bunaltılmasını önlemek için, gerekirse inokülumu on kat azaltın.

SONUÇLAR
Genel amaçlı besiyerler için, tüm test sonuçları ile yeterli, karakteristik büyüme ve tipik koloni morfolojisi elde edilmelidir. Seçici besiyerler için, belirlenmiş organizmaların büyümesi inhibe edilir ve istenen organizmaların yeterli büyümesi elde edilir. Renk ve hemolitik reaksiyon kriterleri yerine getirilmelidir.

REFERANS
National Committee for Clinical Laboratory Standards. 1996. Quality assurance for commercially prepared microbiological culture media, 2nd ed. Approved standard. M22-A-2, vol. 16, no. 16. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Wayne, PA.

"Tipik" kimyasal bileşimler, ortam bileşenleri üzerinde belirlenmiştir. Tipik analiz, spesifik beslenme özellikleri gerektiğinde araştırma veya üretim ihtiyaçları için ürünleri seçmek için kullanılır. Tipik analizin özellikleri arasında :

• Fiziksel karakteristikler,
• Azot içeriği,
• Amino asitler,
• İnorganikler,
• Vitaminler, ve
• Biyolojik testler.

Tüm değerler; % = g/100 g. olarak gösterilmiştir.

SÖZLÜK

KÜL
Kül içeriği ne kadar yüksek olursa, hazırlanan bileşenin berraklığı o kadar düşük olur. Kül içeriği sodyum klorür içerir, sülfat, fosfatlar, silikatlar ve metal oksitler. Asitte çözünmeyen kül tipik olarak hayvan yeminde bulunan silikatlardan gelir.

NEM
Daha düşük nem seviyeleri (<.5%) tercih edilir. Susuz içerik maddelerinde daha yüksek nem seviyeleri stabiliteyi azaltabilir. Yüksek nem ve yüksek ortam sıcaklıklarının varlığında, kimyasal etkileşimler ürünün kararmasına ve pH'ın düşmesine neden olur. Bu özellikler ürünün bozulmasını gösterir.

AZOT
Toplam Azot: Toplam azot genellikle kjeldhal veya titrasyon yöntemi ile ölçülür. Tüm organik azot besleyici değildir. Yüzde (%) azot x % 6.25 protein, peptit veya amino asit bulunur.
Amino Azot: Amino azot değeri, serbest amino gruplarındaki artışı ölçerek protein hidroliz derecesini gösterir. Bu besin açısından anlamlı bir değerdir.

PH
Depolama veya işlemden sonra, pH değerlerinde belirtilen değerlerde meydana gelen değişiklikler bozulmayı gösterir. Bu değişikliklere genellikle son ürünün kararması eşlik eder. Hidrolizatlar, kendi doğal tamponlama (fosfat) kapasitelerine göre pH dirençlerinde farklılık gösterir.

FOSFAT
Yüksek fosfat içerikli bileşenler, fosfatların doğal tamponlanmasından dolayı pH indikatör ortamı için uygun olmayabilir.

Bununla birlikte, fosfatlar, kasıtlı olarak sodyum fosfat ilavesi ile arttırılabilen gaz üretimine yardımcı olur.

TUZ
TNaCl içeriği, örneğin asit hidrolizatları gibi işlem sırasında önemli pH ayarlamalarını yansıtabilir. (Bkz. Kül)

TEMEL METALLER
Metaller antimikrobiyal aktiviteyi doğrudan antagonize edebilir veya toksin üretimini etkileyebilir, metalleri sekestre etmek ve medyayı berraklaştırmak için kültür ortamına kenetleme maddeleri ilave edilebilir.

Susuz Besiyerler oldukça higroskopiktir ve serin bir ortamda saklanmadıkça kolayca bozulur. Kuru bir yerde parlak ışıktan uzak saklanmalıdır.

Bu yüzden susuz besiyerlerin depolanmasına dikkat edilmelidir.

Susuz kültür besiyeri kullanılırken aşağıdaki talimatlar izlenmelidir.
1. Etikette verilen talimatları dikkatlice okuyun.
2. Parti no. ve kabı açmadan önceki tarihi not edin.
3. Kullanmadan önce besiyerin fiziksel olarak bozulmadığını doğrulayın.
4. Besiyer ortamı higroskopik olduğundan, lütfen kullanımdan sonra kabın sıkıca kapatıldığından ve serin ve kuru bir yerde saklandığından emin olun..

BESİYERİN ÇIKARILMASI : Çözünme için, hazırlanacak ortamın hacminden iki-üç kat daha büyük, hasar görmemiş cam eşyalar kullanın. Suya uygun U.S.P./I.P spesifikasyonları kullanılmalıdır.
Temiz ve kuru bir şişeye doğru şekilde tartılmış miktarda besiyer koyun. Suyun bir kısmını ekleyin ve eriyene kadar karıştırın, ardından gerekli hacmi oluşturmak için kalan suyu şişenin yanlarından ekleyin. Tam çözünme için, besiyerin aşırı ısınmasını önlemeye dikkat edin.

pH AYARLAMASI : Hazırlamalardan sonra ortamın pH'ı, 25°C'de etikette belirtilen değere uygun olmalıdır. Gerekli olursa 1N/0.1N HCI veya NaOH solüsyonu eklenerek pH uygun değere getirilmelidir.

STERİLİZASYON : Besiyerin sterilizasyonu genellikle bir otoklav kullanılarak 15 dakika boyunca 121°C'de gerçekleştirilir. Otoklav verimliliği zaman zaman kontrol edilmelidir.

STERİLİZE BESİYERİN DOLDURULMASI : Sterilizasyondan sonra Agar ortamı 45-50°C'de petri kaplarına dökülmelidir. Ortam kabarcık oluşumundan kaçınarak iyice karıştırılmalıdır. Agar yüzeyi inokülasyondan önce mikrobiyal kaymayı önlemek için inkübatörde 30-40°C'de kurutulmalıdır.

HAZIR BESİYERİN SAKLANMASI : Besiyer aynı gün kullanılmadığı sürece, nem geçirmez kaplarda saklanmalıdır.

Agar içeren besiyerler daha yüksek sıcaklıklarda saklanmamalıdır. Agar plakalar 2-8°C'de kapalı neme dayanıklı kaplarda saklanmalıdır.
Hazırlanan kültürün stabilitesi sınırlıdır ve önemli ölçüde değişiklik gösterir. Besiyeri asla 0°C'nin altında saklamayın.

BESİYERLERİN İMHASI : Tüm örnekler ve kültürler dikkatle kullanılmalı ve otoklav olmadan atılmamalıdır. Kültürler atmadan önce 121°C'de yaklaşık 30 dakika otoklavlanmalıdır.

MICROGEN KÜLTÜR BESİYERLERİ :Mikrogen kültür besiyerlerinde istenen sonuçları elde etmek için , belirtilen saklama koşullarında saklanmalıdır. Bu ürünlerin parti numarası, üretim tarihi sırasıyla kullanılması önerilir.

MİCROGEN kültür ortam ürünlerinin depolama sıcaklığı ve raf ömrü aşağıdaki gibidir.

(a) Susuz Besiyerler : Belirtilen koşullar altında saklanırsa susuz besiyerlerin raf ömrü 2 ila 5 yıl arasında olacaktır. Susuz ortamlar için depolama sıcaklığı tercihen 8 ila 25°C arasında olmalıdır.

(b) Selective Takviyeler : At serumu (-20°C) hariç diğer tüm takviyelerin 2 - 8°C'de saklanması gerekir. Bu ürünlerin 1-3 yıl raf ömrü vardır.

(c)Antimikrobiyal duyarlılık diskleri : Bu ürünler -20°C'de saklanmalıdır. Raf ömrü 28°C sıcaklıkta 1-3 yıl'dır.

Susuz Besiyer Kullanırken Alınması Gereken Bazı Önlemler

Hatalar	Nedenleri
PH hidrolizinde kayma	Aşırı ısınma, eksik karıştırma, uzun süreli sterilizasyon, alkali cam kullanımı, saf olmayan su, bileşenler, yüksek sıcaklıkta uzun süreli saklama.
Eksik Çözünürlük	Agar ortamının yetersiz ısıtılması yetersiz karıştırma.
Karartma	Ortamın aşırı ısınması, aşırı miktarda susuz toz, yanlış karıştırma.
Yumuşak Jel	Agar çözelti içinde değil, susuz ortamın yanlış sulandırılması, agarın asit hidrolizi, incoclum tarafından agar seyreltmesini telafi edememe
Büyüme Kaybı	Tekrarlanan yeniden eritme, aşırı ısıtma, eksik karıştırma, bileşenlerin seyreltilmesini telafi edememe, formüldeki aşılama taşıyıcıları tarafından bozulma vb.
Besiyerde Anormal Renklenme	Bozulmuş susuz ortam, yanlış yıkanmış cam eşyalar, suyun kirlenmesi.
Kontaminasyon	Hatalı / Yetersiz sterilizasyon. Zenginleştirme ve dökme plakalarının eklenmesinde zayıf teknik.